8月19日 中國田徑隊的第二次申訴也被國際田聯駁回，這樣4×100米女隊確定徹底無緣決賽。
在4×100米的預賽中，中國隊跑出了42秒70的成績，而另一組的美國隊則出現了交接棒失誤的情況。這意味著中國對本來可以以第八名的身份進入決賽。然而當美國隊單獨重賽後，名將雲集的她們跑出了41秒77的成績，將中國隊擠掉。這也令中國姑娘感到悲憤異常。
然而美國隊隨即提出申訴，表示“遭到巴西隊的碰撞，嚴重影響交接棒”。國際田聯回看錄影後，確認巴西隊與美國隊確實出現了碰撞，最終取消東道主巴西隊成績的同時，認定美國隊申訴有效，並做出了美國隊單獨重賽的決定。這一決定令中國田徑隊非常不滿，然而經過三個小時的申訴，中國田徑隊的申訴被最終駁回。
在被國際田聯仲裁委員駁回申訴後，中國隊又提出了第二次申訴。並提出了兩點要求，首先，決賽安排9支隊伍參賽；其次，決賽分為兩組進行，前五名參加第一組，後四名參加第二組。決賽兩組進行此前也沒發生過，但一支接力隊獨自重賽獲得決賽資格，此前也沒發生過。
對於中國隊的這兩點要求，國際田聯仲裁委員會再度駁回，這意味著最後的希望也由此破滅，中國接力隊的姑娘們，只能眼睜睜的看著自己會被剝奪參加決賽的資格。
國際田聯新聞官表示，決賽分為兩組進行，這是不可能的，同時單獨重賽有先例可循。除此之外，如果里約的田徑賽場上有九條賽道。那麼中國隊肯定可以進入決賽，然而令人遺憾的是，里約的田徑賽場上，只有八條賽道。
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